流式细胞 GFP
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/12 06:57:29
只能先就标题的问题谈谈我的认识.后面的追问我了解得也不全面.1.两者的结果检测方法不同.GFP绿色荧光蛋白,很直观,能够直接检到荧光,在普通的细胞培养条件下都能够观察到,对细胞的生命活动和其他并行的实
只要没有整合到基因组DNA,转染进入的外源性DNA都会随着细胞分裂而被稀释.所以经过10天后表达肯定是会减弱的,这是正常现象.只有当外援DNA整合到基因组后,表达水平才能稳定
GFP和PI的激发光有很大的重叠.做compensation的时候会很困难.你必须提供GFP,Annexin5和PI单个阳性的细胞.
首先,你这个实验室双色的,就要做compensation.技师应该和你说明的啊.如果你自己做的话,我简单和你说一下:RFP和GFP的激发光谱有部分是重叠的,所以必须在检测的时候去掉重叠的部分(comp
转染成功一般都会表达GFP蛋白,这个蛋白在流式上面可以用FL1通道检测到.转染成功的有表达,不成功的没表达,很容易算出细胞转染率.
1.是100个细胞中表达CD33的细胞占80%2.CD33是粒细胞表面标志;CD19是B细胞表面标志.没有阳性阴性一说.主要是看是否是克隆增殖(癌变)3.见异常细胞是诊断标准,CD33达80%,提示是
这个是相对量,处于G1期的细胞设为1,G2期的就为2.S期的位于1-2之间,如果是凋亡细胞就小于1.单倍体的生殖细胞是0.5
流式细胞仪不能检测游离的Ig,但是如果细胞表面结合有IgG或者IgM等免疫球蛋白,则这些免疫球蛋白可以被抗免疫球蛋白的抗体识别.如果这些二抗被荧光染料标记,就可以用流式细胞仪来检测细胞表面是否有免疫球
一般流式细胞仪都有FITC通道,GFP可以用该通道来测量.用同一细胞系的转染了无GFP质粒的细胞做阴性对照,设置阈值.
很简单的啊.流式细胞仪数据分析5.1数据采集及显示光信号转换成电压脉冲后,再通过模数转换器转换成为计算机能够储存处理的数字信号.流式细胞仪的数据以FSC标准格式存储,该标准由“分析细胞学协会”制定.根
(1)由于图中GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是-TCGA-,因而M端是限制酶HindⅢ剪切形成的黏性末端,N端伸出的核苷酸的碱基序列是-TGCA-,因而N端是限制酶PstⅠ剪切形成的黏性末端.(2
D本题主要考查蛋白质、氨基酸等知识。蛋白质中不可能含有稀有气体元素(Ne),A错;向蛋白质中滴加AgNO3溶液会使蛋白质变性,再加蒸馏水蛋白质不能重新溶解,B错;蛋白质是氨基酸通过缩聚反应得到的,C错
用PI单染就可以,PI是用来测细胞周期的,在单倍体峰前如果有个亚峰则表明有凋亡,但是这个方法不是很好,坏死细胞也会包含在内.准确地说用PI单染测出的凋亡率应该是死亡细胞占细胞总数的比例.建议用Anex
1,载体是否有问题?gfp连接方向?启动子是否匹配?2,没转进去?或者转进去之后没表达?3,荧光显微镜设置是否妥当?
(1)从图示可知,GFP的M端伸出的核苷酸的碱基序列是TTCGA,是限制酶HindⅢ酶的切割位点;N端伸出的核苷酸的碱基序列是CTGCA,是限制酶PstⅠ切割位点;则在构建含该GFP的重组质粒A时,应
(1)HindIII和PstⅠ Ti质粒(2)2(3)目的基因 标记基因(4)核移植 胚胎移植
GFP,即绿色荧光蛋白(GreenFluorescentProtein)2001年1月11日,美国科学家宣布培育成世界上首只转基因猴,这是世界上首次培育成功转基因灵长类动物.添加在这只名为"安迪"的猴
转染率是大概估计一下,有荧光的占总细胞的比率,如果要精确值可以去做流式.再问:请问具体做流式要怎样做,能说具体一点吗?转染率很低做流式会不会没效果?比如不到1%,那流式可以测出来吗?再答:你的转染目的
gfp:联合呼吁程序
荧光强度呗再问:具体怎么做?用什么仪器测啊?再答:荧光显微镜拍照然后拿软件统计下荧光强度就可以啦imageJ就可以吧再问:谢谢您的回答,我这么做过,但总觉得数据不可靠,细微差距比较不出来,不过现在看来