环化的PUCmT载体用Ecor1酶切后电泳检测为什么还是两条带

来源：学生作业帮编辑：大师作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/10 11:53:24

环化的PUCmT载体用Ecor1酶切后电泳检测为什么还是两条带
我要把一个65kb的野生大质粒酶切后进行连接,然后将连到载体上的质粒片断送测序以得到质粒全序列,现有的PUCmT是连接PCR产物用的是线性的A末端,于是我按说明书让载体自连后挑取蓝斑,再提质粒后得到环化的PUCmT,电泳检测为2条带,用Ecor1酶切2小时后电泳检测仍为两条带,现在可以排除内切酶失活,因为我用同样条件切割其他片断均正常,现在想知道这是什么原因应该怎样解决

你提出了两种构型的质粒所以有两条带,另外你的质粒PUCmT应该含有两个Ecor1酶切位点所以虽然有不同构型的智力被切割但产生的片段还是两条,并且大小形同,因为此时片段已经呈现线性.

环化的PUCmT载体用Ecor1酶切后电泳检测为什么还是两条带 pMD19t载体连接片段后酶切,为什么切不掉?最后电泳还是两个条带? 提出来的RNA 电泳检测时没有条带用的是1%琼脂糖电泳在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 载体酶切产物电泳时检测胶上有条带,回收胶上却降解了,请教各位大虾这是怎么回事? DNA电泳图的分析中间两条带是什么我用十一种微卫星引物扩增某一个体的基因组DNA,可是1.0%琼脂糖电泳检测时有的没条带,有的有很多条带?谢用RT-PCR检测目的基因表达差异,需将内参基因的电泳条带亮度调成一致. 我提取的DNA电泳后,条带很暗,而自外检测OD值在正常范围内,上样量为2ul,请问为什么 PCR电泳,为什么没有条带啊? 核酸电泳两条蓝色条带核酸电泳肉眼下观察到两条蓝色条带分别是什么东西,分别对应多大bp的marker?