在CHO细胞表达系统中,通过MTX进行目的基因扩增的原理是什么?

来源：学生作业帮编辑：大师作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/18 19:07:22

由于CHO-dhfr-细胞自身缺失二氢叶酸还原酶（dhfr）,无法自身合成四氢叶酸,所以必须在添加了次黄嘌呤（hypoxanthine）、胸腺嘧啶（Thymidine）和甘氨酸的培养液中才能得以存活.而通过目的基因与dhfr基因共转染,不仅得到在不含上述添加剂的培养基上也能生长的细胞克隆,更为重要的是由于dhfr可被叶酸类似物MTX所抑制,在MTX浓度选择压力下,dhfr基因必须扩增到很多的拷贝数才能生存,从而得到抗MTX细胞系；又由于与dhfr基因共转染的目的基因倾向于同它一起整合到细胞染色体上的同一区域,所以编码外源重组蛋白的序列片段也随着dhfr基因的扩增而扩增,我们就得到了能大量表达外源蛋白的细胞克隆,这在基因工程抗体及各种基因工程蛋白的表达中是可行度很高的一种措施.

在CHO细胞表达系统中,通过MTX进行目的基因扩增的原理是什么? 怎样选择表达载体,目的基因在培养的人类细胞中表达蛋白的原理? PCR扩增技术获取目的基因的原理是? 对PCR扩增后的目的基因如何进行提取用PCR技术进行目的基因扩增目的基因的表达请判断：在基因工程操作中,只要在受体细胞中检测到目的基因,就能表达目的基因导入受体细胞是怎样进行的?如何防止目的基因与质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接?请已知一个基因的mRNA和cDNA,我想克隆此基因,进行转染表达,但是设计的引物无法扩增出目的片段……急求! 在基因工程中,目的基因在受体细胞中维持稳定和表达的过程叫做什么? 我有一段目的基因,需要构建表达载体,此时是扩增目的基因的全长还是? 标记基因为什么能检测含有目的基因的细胞?没插入目的基因的同样也能表达标记基因啊?（标记基因在插入转化后的重组子进行PCR,扩增出来的是目的基因还是整个质粒?为什么DNA测序是在转化后才进行?