我把一段140碱基的片段和载体GFP.c1酶连后,然后酶切跑电泳,条带上有140的条带,结果测序结果为空载体

来源：学生作业帮编辑：大师作文网作业帮分类：语文作业时间：2024/11/19 14:40:23

我把一段140碱基的片段和载体GFP.c1酶连后,然后酶切跑电泳,条带上有140的条带,结果测序结果为空载体
请问这是为什么啊?

通用引物测的么?确实奇怪载体上这两个酶切位点之间隔了多远可能你切下来的是载体上的那部分
再问：是用的通用引物，酶分别是Apa1和Kpn1,两者之间就隔着两个碱基，你说的这种情况不太可能啊。。。
再答：你是连接后直接酶切跑电泳还是转化提质粒后酶切跑电泳
再问：转化提质粒后酶切跑电泳
再答：不知道了难道是质粒不纯么如果那片段有PCR引物的话拿那个去给公司测序看看吧估计没有所以没有菌P验证是吧

我构建的穿梭载体,连接好后进行双酶切和PCR两个途径的检测,结果酶切没有条带显示,而PCR确有目的条带! 我的目的片段连载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR,没有条带. 用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带. 提取的质粒跑电泳出来带很杂,目的片段1700bp,用的是pMD19—T载体,从左往右第三泳道和第九泳道是空质粒我进行的是原核蛋白表达,表达载体是PET32a,表达菌液超声后在上清电泳条带很好,可是没有酶活用总RNA跑电泳,rRNA是什么样子的条带?三条带是如何排列的? 用takara的酵母菌DNA提取试剂盒提取rDNA,PCR后跑电泳总没结果,出现火星带,没有条带,怎么回事? 双酶切老是切不完全我PCR克隆了一段200bp的基因片段,然后连接到了T载体,引物2端各有EcoRI和HindIII的酶做Western Blot 跑电泳之后的胶上Marker的条带,比较清晰,但与模板Marker的条带却对应不上,而且少一怎么才能把western blot 结果的条带弄漂亮点我看文献上的很漂亮啊我的怎么那么丑啊 pcr结果出不来,每次都是只有100bp以下的条带,没有其他的条带 PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.