用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/12 00:07:06
用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.
试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就换了一个新的,结果还是提不出来,操作应该也没有问题,电泳的话,marker跑的很好,pcr的话,用相同的引物相同的机器做其他实验也是有结果的,所以应该也没有问题.请问还有哪些可能的原因啊.
试剂盒应该没有问题,因为不久前还用,都提出来了.而且因为提不出来,就换了一个新的,结果还是提不出来,操作应该也没有问题,电泳的话,marker跑的很好,pcr的话,用相同的引物相同的机器做其他实验也是有结果的,所以应该也没有问题.请问还有哪些可能的原因啊.
PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来的东西跑个胶看一看.如果抽出来了,但是PCR没跑出来,就把模板浓度降低一下;如果DNA没跑出来,就要从抽提步骤上找问题.
你们用的试剂盒是洗脱柱类型的吗?如果是,就我们自己的操作,仅仅靠试剂盒里提供的试剂,抽提效果不好,一般我们先用自己配制的抽提缓冲液(参考分子克隆)把组织磨碎、离心弃上清后后再用试剂盒里面相关的试剂操作,需要注意的是样品要研磨充分、量不要贪多.
如果是离心沉淀的方法,分子克隆书上提供的就可以搞定.
再问: 刚刚跑了提出来的基因组,是没有问题的,也就是说是pcr出了问题,貌似模板加了太多了(25微升体系加了3微升模板),为什么模板浓度太高PCR就没有结果呢。。。。
再答: 模板的浓度是有一个合适范围,具体为什么,上课的东西都还给老师了。个人感觉如果模板太多,95度那一步应该不能完全解链,特别是基因组DNA。
你们用的试剂盒是洗脱柱类型的吗?如果是,就我们自己的操作,仅仅靠试剂盒里提供的试剂,抽提效果不好,一般我们先用自己配制的抽提缓冲液(参考分子克隆)把组织磨碎、离心弃上清后后再用试剂盒里面相关的试剂操作,需要注意的是样品要研磨充分、量不要贪多.
如果是离心沉淀的方法,分子克隆书上提供的就可以搞定.
再问: 刚刚跑了提出来的基因组,是没有问题的,也就是说是pcr出了问题,貌似模板加了太多了(25微升体系加了3微升模板),为什么模板浓度太高PCR就没有结果呢。。。。
再答: 模板的浓度是有一个合适范围,具体为什么,上课的东西都还给老师了。个人感觉如果模板太多,95度那一步应该不能完全解链,特别是基因组DNA。
用takara的试剂盒提取大米和大豆的基因组,pcr之后跑电泳,但是电泳总是没结果,没条带.
用takara的酵母菌DNA提取试剂盒提取rDNA,PCR后跑电泳总没结果,出现火星带,没有条带,怎么回事?
mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带 但是做了50微升体系的之后跑电泳 许多不出条带
用快速试剂盒提取土壤DNA 效果还好.PCR扩增后 marker很好,就是其他没条带,用的50ul的Taq酶体系p的,请
在做哺乳动物组织基因组dna的提取试验中,将提取好的dna跑电泳,若基因组dna有蛋白质和rna污染会有什么电泳结果
我用十一种微卫星引物扩增某一个体的基因组DNA,可是1.0%琼脂糖电泳检测时有的没条带,有的有很多条带?谢
人基因组DNA通过试剂盒提取出来之后跑电泳是一点而不是一个范围,本人概念很模糊..
提取细菌DNA检测到有条带,PCR后无条带;而基因组DNA检测到无条带的,PCR后却有条带.怎么解释?
PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.
PCR中,PCV2的引物扩增后,跑电泳的条带在多少bp?
在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么?
用总RNA跑电泳,rRNA是什么样子的条带?三条带是如何排列的?