为什么BamH I和Sal I 双酶切要分步酶切,哪个酶先切?

请问谁做过Taraka的BamH I 与Fermentas的BstBI的双酶切?如何选择buffer?如何进行分步酶切? 买的是TAKARA的内切酶 Sal I BamH I ,但是最适合温度一个37一个30,BUFFER选的是1.5T,想问 想用PCR扩增下面一段序列,急求高手写出上游引物和下游引物.要求上游加EcoRⅠ酶切位点、下游加BamH I酶 例题是：限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列.下图为四种限制酶BamH I、EcoR．I I greatly regret that I’m unable to attend the important sal i am doing well 和 i am doing good 哪个对,为什么,副词修饰动词? 比如说I am playing football. 和I playing fottball .哪个对 为什么 I'll be seeing you.和I'll be see you.哪个对?为什么 I __ I could fly to the moon one day.wish 和hope哪个正确?为什么? I don't believe so和I'm not believe so 哪个正确?为什么? 我感到无聊的英文,I feel boring.和I feel bored.哪个正确,为什么? she buys clothes from stores that i^m intimidated by the sal