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如何用标记基因检测目的基因导入载体

来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/19 19:57:34
如何用标记基因检测目的基因导入载体
我所疑惑的是,标记基因不是在运载体上吗,目的基因的插入对它也不会有影响啊?对三楼提问,既然不影响,那为什么你说检测到标记基因也证明目的基因导入了?
如何用标记基因检测目的基因导入载体
你的题目太笼统,我简言之:
对于细菌而言:
通常标记基因和目的基因都位于一个载体上,标记基因通常为抗生素抗性基因,用含抗生素的平板筛选,长出来的菌落一般都是阳性克隆.也就是:如果检测到了标记基因,就认为目的基因也导入到细菌了.
此外,还可以用蓝白斑筛选(alfa-互补原理),将目的基因插入质粒后,如果有目的基因,则菌落在特定的平板上(通常是假X-GAL 及 IPTG),菌落会呈现白色,而阴性菌落呈蓝色.
对于真核生物,如酵母菌,处用抗生素外,还可以用氨基酸缺陷型平板进行筛选.
对于哺乳动物细胞而言,方法更多:如各种报告基因:荧光蛋白,荧光素酶,抗除草剂基因等等来指示目的基因是否转染到了细胞内.
补充:
当然不会受影响了,存在于同一载体,但是彼此独立.