我最近在用液相色谱,需要在226nm处检测物质,可是每次基线都是不稳定的,到底怎么回事呢?
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/30 20:11:30
我最近在用液相色谱,需要在226nm处检测物质,可是每次基线都是不稳定的,到底怎么回事呢?
我以为是紫外灯的原因,可是当我换了紫外灯后,在226nm下基线还是不稳,于是我换了一个波长,比如254,290nm等等,他们的基线就非常稳定.我同时排出了柱子的干扰,我们实验室两根柱子,都在226nm跑基线,发现都是不稳的,两根柱子都没有问题.请问怎么回事呢?
我以为是紫外灯的原因,可是当我换了紫外灯后,在226nm下基线还是不稳,于是我换了一个波长,比如254,290nm等等,他们的基线就非常稳定.我同时排出了柱子的干扰,我们实验室两根柱子,都在226nm跑基线,发现都是不稳的,两根柱子都没有问题.请问怎么回事呢?
1)流动相的背景吸收太大了.226nm是末端吸收,如果流动相本身有较强的吸收(试剂含有杂质),会大大降低系统的灵敏度,导致基线波动,换成高波长(非末端吸收)就没有问题恰恰说明了这一原因.可以将流动相按照《中国药典》紫外测定方法的“溶剂要求”的项下的方法扫描一下该流动相的末端吸收,看在226nm是否达到要求.2)如果流动相没问题,是色谱系统太脏了,平时在高波长看不到的柱上残留的物质极其降解产物,一旦换到低波长就可以被检测器检测到了,看上去就像是基线波动.用100%色谱甲醇连续冲两个小时基本能干净.
我最近在用液相色谱,需要在226nm处检测物质,可是每次基线都是不稳定的,到底怎么回事呢?
我要检测物质在230nm处的紫外吸收峰,可以用乙醇做为溶剂么?谢谢
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