PCR实验中加cDNA模板量是否要一致?
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:数学作业 时间:2024/09/29 09:33:35
PCR实验中加cDNA模板量是否要一致?
我的3个样本在逆转录成cDNA后测浓度发现,样本1浓度是599ng/ul,样本2为1000左右,样本3为1290,
1.在做PCR时,加入的cDNA体积是不是应该根据浓度调整为,样本1 2ul 样本2 1.2ul 样本3 1ul 这样呢?
2.如果都加1ul,是否可以通过与内参的亮度比较来消除浓度差异的影响呢?
我的3个样本在逆转录成cDNA后测浓度发现,样本1浓度是599ng/ul,样本2为1000左右,样本3为1290,
1.在做PCR时,加入的cDNA体积是不是应该根据浓度调整为,样本1 2ul 样本2 1.2ul 样本3 1ul 这样呢?
2.如果都加1ul,是否可以通过与内参的亮度比较来消除浓度差异的影响呢?
1.是的,一般加样量按质量算(微克),同组样品一定要加一样多,否则无法横向比较.加样体积应精确至小数点后一位.
2.不能.PCR本来就半定量了,不能再引入误差了.内参亮度不一致,没人会接受你的数据.
2.不能.PCR本来就半定量了,不能再引入误差了.内参亮度不一致,没人会接受你的数据.
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