作业帮 > 语文 > 作业

要用ELISA试剂盒检测人白介素17受体(IL-17R),用什么方法能让细胞中的受体蛋白更好的释放出来?

来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:语文作业 时间:2024/11/12 01:22:59
要用ELISA试剂盒检测人白介素17受体(IL-17R),用什么方法能让细胞中的受体蛋白更好的释放出来?
IL-17受体主要是膜蛋白,有人说用做Western提膜蛋白的试剂盒就行,不知道用来做ELISA的和做Western对蛋白的要求一样不,有没有做ELISA专用的裂解细胞提膜蛋白的液体或试剂盒?请用ELISA测过膜蛋白的前辈指教!
要用ELISA试剂盒检测人白介素17受体(IL-17R),用什么方法能让细胞中的受体蛋白更好的释放出来?
膜蛋白的溶解性很不好,理论上做Western提膜蛋白的试剂盒可以用,你买试剂盒前问一下厂家,提出的蛋白是变性的还是非变性的,如果是变性的,可能你就没法用了.因为就我的理解,变性蛋白去做ELISA,很有可能出不了结果.
国内一些厂家的膜蛋白的试剂盒主要是用的曲拉通114.最后的蛋白是溶解在曲拉通里面.还得用三氯乙酸沉淀等.不过听说默克化工有一个比较好的膜蛋白提取试剂质量比较好,你可以查得看一看,不过,很贵.
但从另一方面讲,就算是很好的提出了膜蛋白,你的ELISA也不一定能做出结果.因为就我的理解,不溶性蛋白做ELISA,这个原理上就讲不通啊.
当然,也许这个ELISA盒子经过特别处理,如抗体本来就是识别的变性蛋白,那就又当别论了.
不知道你的盒子是买哪家公司的?是否可靠(ELISA假货特别多,多得超出你的想象)?可以问一下盒子的厂家,看他们推荐怎么处理样品.
再问: 我查到了德国默克的ProteoExtract 跨膜蛋白抽提试剂盒,用来提取跨膜蛋白很好,武汉一家代理商的价格是650元/盒。 另外我买的是上海劲马公司的进口分装的ELISA试剂盒,不知道您对这家公司试剂盒的质量是否了解。十分感谢!
再答: 那个提膜蛋白的应该是那个,但我没用过。大厂出品的,应该是没什么大的问题。 关于ELISA,我也不好攻击人家的东西,毕竟都在这个行业混。分装的ELISA基本不真实。就算是原装的也不一定是真的(伪原装)。 只有象基因,吉泰,还有以前的晶美这种公司的比较可信一点。你一个盒子很难判断真假。标准曲线肯定是没问题。如果厂家给你提供的是一个IL-6。而说是IL-17R,你怎么判断?不过从另一方面讲,你这个指标可能是没有厂家在生产,而你又要做这个指标,应付一下老板。 不过有可能我的知识有限,人家的盒子很好。如果没办法,可以测得试一下。看看结果如何再说吧。