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细菌染色体DNA的提取各个步骤原理!跪谢~

来源：学生作业帮 编辑：大师作文网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/13 16:40:41
细菌染色体DNA的提取各个步骤原理!跪谢~
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1．取细菌培养物1.5 mL 于5000 rpm离心1分钟,倾去上清液.
2．取沉淀加100 μL预冷的溶液I摇匀并悬浮细胞,再加200 μL预冷的溶液II摇匀后冰浴5分钟,最后加入150 μL预冷的溶液III摇匀后冰浴5分钟,12000 ×g离心5分钟或10000 ×g离心8分钟.这一过程可使大部分的质粒DNA被释放至上清液中.
3．取上清液加等体积的苯酚—氯仿—异戊醇,5000 ×g离心4分钟,再取上清液加入等体积氯仿于5000 rpm离心6分钟.这一步骤主要是为了去除上清液中的蛋白质和脂类等杂质.
4．取上清液加等体积异丙醇,室温放置5分钟后12000 ×g离心5分钟或10000 ×g离心8分钟.75%乙醇浸洗沉淀两次,冷冻干燥后保存于冷乙醇中或直接超低温保存.（这就是细菌DNA提取的步骤）
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