大师作文网转基因植株检测时PCR出不来,可以用酶切检测吗
来源：学生作业帮 编辑：大师作文网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/11/10 22:53:41
转基因植株检测时PCR出不来,可以用酶切检测吗
你确定基因组没有酶切位点吗?可以检测出了来吗?
再问： 不能确定啊！能否对酶切后符合目标大小的片段回收后在进行扩增
再答： 基因组那么大，我觉得不太可行，因为差不多大小的片段应该很多吧，你pcr检测不出来，也许是你根本就没转进去，或者转得是空载。
再问： 那请问你有什么好的办法吗?扩标记基因可以扩出来啊
再答： 你可以试一下，如果正反引物都设计在载体上可以p出来，就说明是转的空载。实在不行，你就先种下去，看一下有没有表型吧。
再问： “如果正反引物都设计在载体上可以p出来，就说明是转的空载”，麻烦你说的详细一些，怎么看出转的是空载！
再答： 你检测转基因的引物肯定是一个在载体上，一个在目的基因上，如果这样p不出来，而在你的载体上的引物可以p出来，就可以说明，当然你可以看产物的的长度。你把两条引物分别设计在目的基因两端的载体上，通过长度，是否等于你的目的基因的长度加上载体上片段就知道了。
再问： 不能确定啊！能否对酶切后符合目标大小的片段回收后在进行扩增
再答： 基因组那么大，我觉得不太可行，因为差不多大小的片段应该很多吧，你pcr检测不出来，也许是你根本就没转进去，或者转得是空载。
再问： 那请问你有什么好的办法吗?扩标记基因可以扩出来啊
再答： 你可以试一下，如果正反引物都设计在载体上可以p出来，就说明是转的空载。实在不行，你就先种下去，看一下有没有表型吧。
再问： “如果正反引物都设计在载体上可以p出来，就说明是转的空载”，麻烦你说的详细一些，怎么看出转的是空载！
再答： 你检测转基因的引物肯定是一个在载体上，一个在目的基因上，如果这样p不出来，而在你的载体上的引物可以p出来，就可以说明，当然你可以看产物的的长度。你把两条引物分别设计在目的基因两端的载体上，通过长度，是否等于你的目的基因的长度加上载体上片段就知道了。