请问普通明视野光学显微镜.暗视野显微镜.相差显微镜.微分干涉显微镜各自的结构上有什么不同以及观察的效果有什么不同.
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/10 22:57:36
请问普通明视野光学显微镜.暗视野显微镜.相差显微镜.微分干涉显微镜各自的结构上有什么不同以及观察的效果有什么不同.
大二生物科学专业的知识吧 生活的细菌在【明视野显微镜】下观察是透明的,不易看清.暗视野显微镜的原理与来自缝隙的一束强光通过暗室时,可清楚地看到其中细微灰尘的现象是一样的,即给样品照明的光不直接穿过物镜,而是由样品上反射或折射的光进入物镜,那么,在漆黑的视野中,由于反差增大了,使样品能够看得更清楚.因用暗视野法可以在黑暗的视野中看到光亮的菌体,故在观察生活细菌及细菌运动时常采用此法.【暗视野显微镜】的构造主要是采用一种特殊的聚光器,在聚光器的下方中央为圆形黑盘所遮,光仅由周缘进入,使光会聚于载玻片上,并斜照物体,物体经斜射照明后,发出反射光可进入物镜,这样,造成显微镜视野黑暗,而其中的物体明亮.如无暗视野显微镜时,只需将明视野显微镜上的聚光器取下,换上暗视野聚光器即可;也可在明视野显微镜聚光器下面的滤光镜支架上放一片星形挡板(star diaphragm)(图Ⅲ-6)构成暗视野,这种方法适用于低倍镜观察.在暗视野中,由于有些活细胞其外表比死细胞明亮,所以暗视野也被用来区分死、活细胞,此技术现已被用于各种酵母细胞的死、活鉴别.【相差显微镜】具有两个其他显微镜所不具有的功能:①将直射的光(视野中背景光)与经物体衍射的光分开;②将大约一半的波长从相位中除去,使之不能发生相互作用,从而引起强度的变化.相差显微镜的基本原理是,利用物体不同结构成分之间的折射率和厚度的差别,把通过物体不同部分的光程差转变为振幅(光强度)的差别,经过带有环状光阑的聚光镜和带有相位片的相差物镜实现观测的显微镜.主要用于观察活细胞或不染色的组织切片,有时也可用于观察缺少反差的染色样品.【微分干涉显微镜】的物理原理完全不同于相差显微镜,技术设计要复杂得多.DIC利用的是偏振光,有四个特殊的光学组件:偏振器(polarizer)、DIC棱镜、DIC滑行器和检偏器(analyzer).偏振器直接装在聚光系统的前面,使光线发生线性偏振.在聚光器中则安装了石英Wollaston棱镜,即DIC棱镜,此棱镜可将一束光分解成偏振方向不同的两束光(x和y),二者成一小夹角.聚光器将两束光调整成与显微镜光轴平行的方向.最初两束光相位一致,在穿过标本相邻的区域后,由于标本的厚度和折射率不同,引起了两束光发生了光程差.在物镜的后焦面处安装了第二个Wollaston棱镜,即DIC滑行器,它把两束光波合并成一束.这时两束光的偏振面(x和y)仍然存在.最后光束穿过第二个偏振装置,即检偏器.在光束形成目镜DIC影像之前,检偏器与偏光器的方向成直角.检偏器将两束垂直的光波组合成具有相同偏振面的两束光,从而使二者发生干涉.x和y波的光程差决定着透光的多少.光程差值为0时,没有光穿过检偏器;光程差值等于波长一半时,穿过的光达到最大值.于是在灰色的背景上,标本结构呈现出亮暗差.为了使影像的反差达到最佳状态,可通过调节DIC滑行器的纵行微调来改变光程差,光程差可改变影像的亮度.调节DIC滑行器可使标本的细微结构呈现出正或负的投影形象,通常是一侧亮,而另一侧暗,这便造成了标本的人为三维立体感,类似大理石上的浮雕.
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