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用多孔培养板培养杂交瘤细胞后,其上清液成分?

来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/11/13 18:13:09
用多孔培养板培养杂交瘤细胞后,其上清液成分?
用多孔培养板培养杂交瘤细胞后,其上清液成分?
上清液中的我们关心的成分应该是杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体~
再问: 你好, 也就是说上清液中含有单一抗体?那有没有杂交瘤细胞?一般进行阳性检验之前,都会选取上清液,这是为什么呢?
再答: 因为细胞在培养板上是贴壁生长的,这个是动物细胞的一个特性。然后你想,抗体本身属于一种分泌型蛋白对吧,那么就会被细胞释放到上清液中。 阳性检测就是为了看是否有抗体产生吧,那么抗体如果有,是存在于上清液中的~
再问: 那上清液中会有杂交瘤细胞吗?因为阳性检测后,会得到产生抗体能力强和抗体特异性强的杂交瘤细胞,这就说明之前应该也会有细胞参与了检测过程中啊...
再答: 上清液里不会有杂交瘤细胞,它们都贴在培养板底部。 阳性检测是这样进行的,首先,在融合形成了杂交瘤细胞后,会把他们分在一个多孔的培养板的各个孔里,然后在适当的条件下让它们产生抗体之后,检测抗体的特异性,这个一般会用western blotting 的方法,不知道你是否了解。 如果某一个孔的抗体很多且特异性强,那么就说明这个孔的细胞产生抗体能力强,那么我们就保留生产能力最高的细胞,也就是得到了“产生抗体能力强和抗体特异性强的杂交瘤细胞”。 实际情况是,在融合的过程中,总有一些细胞会出现这样那样的问题,所以说我们要多做很多孔细胞,然后再进行选拔 得到好的细胞不意味着直接对细胞进行检测哦~
再问: 哦~是这样啊~那我可以将阳性检测的全过程,说成“是对产生单抗杂交瘤细胞的进一步筛选”吗?
再答: 可以的,因为我很肯定阳性检测是检测的抗体,虽然我没做过杂交瘤细胞,但是我做过用小鼠细胞产其他分泌蛋白的实验,收上清液直接检测蛋白是很方便的一种方法。以产量来进行2-3次筛选就能得到产量比较高的细胞株了~因为如果想检测细胞的话基本无从下手~~