关于一段NCBI上没有的基因序列
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/20 06:27:07
关于一段NCBI上没有的基因序列
该基因在NCBI上没有登录,但是同目物种的该基因有.
通过基因的电子克隆未果.
通过同目物种的该基因的同源性分析,用同源性高的序列与该物种的EST库进行比较,无结果.
如果我现在想要克隆出该基因应该怎么办?
该基因在NCBI上没有登录,但是同目物种的该基因有.
通过基因的电子克隆未果.
通过同目物种的该基因的同源性分析,用同源性高的序列与该物种的EST库进行比较,无结果.
如果我现在想要克隆出该基因应该怎么办?
提取该物质总RNA做反转录
获得cDNA后合成双链
根据同源物种的该基因序列设计引物(简并引物)
PCR扩增得到目的片段(可能会用到巢式PCR增加特异性)
切胶回收纯化
质粒载体连接转染
筛选获得重组子测序
得基因序列后根据此序列再次设计引物
做3’和5’RACE
再次测序确认得到全长基因
利用拟南芥突变体做该基因的功能分析
这是我一同学做的博士论文实验过程
做的是某一树种的基因同源克隆
获得cDNA后合成双链
根据同源物种的该基因序列设计引物(简并引物)
PCR扩增得到目的片段(可能会用到巢式PCR增加特异性)
切胶回收纯化
质粒载体连接转染
筛选获得重组子测序
得基因序列后根据此序列再次设计引物
做3’和5’RACE
再次测序确认得到全长基因
利用拟南芥突变体做该基因的功能分析
这是我一同学做的博士论文实验过程
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