PCR琼脂糖凝胶电泳后发现核酸向负极方向反着跑到胶的头部了,怎么回事?
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/26 05:16:11
PCR琼脂糖凝胶电泳后发现核酸向负极方向反着跑到胶的头部了,怎么回事?
我研究的方向是分子生物学,这几天一直在做细菌核酸提取及16SrDNA通用片段常规PCR检测,提取核酸方法是用水煮法,可每次PCR完跑电泳后,发现结果都是核酸向负极方向反着跑了,和Marker方向相反,跑到槽的上方,查了好多资料就是没说到这方面的原因,然后换了用QIAGEN的试剂盒提取,还是出现了一样的结果,我做的是革兰氏阴性菌的,理论上应该很简单,可就是见鬼了,毕业实验时间迫在眉睫了...
附图
我研究的方向是分子生物学,这几天一直在做细菌核酸提取及16SrDNA通用片段常规PCR检测,提取核酸方法是用水煮法,可每次PCR完跑电泳后,发现结果都是核酸向负极方向反着跑了,和Marker方向相反,跑到槽的上方,查了好多资料就是没说到这方面的原因,然后换了用QIAGEN的试剂盒提取,还是出现了一样的结果,我做的是革兰氏阴性菌的,理论上应该很简单,可就是见鬼了,毕业实验时间迫在眉睫了...
附图
这里有个论坛,讨论这事
http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/18605.html
你看看有没有他们提到的任何一种情况?
还有,你做的是PCR,可以看到有未结合的引物在下方,而你在上方的那些条带看起来并不是PCR产物(太长).PCR产物看起来应该和Marker类似(形状).建议你换个PCR试剂盒看看.
再问: 好的,我去看看~
http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/18605.html
你看看有没有他们提到的任何一种情况?
还有,你做的是PCR,可以看到有未结合的引物在下方,而你在上方的那些条带看起来并不是PCR产物(太长).PCR产物看起来应该和Marker类似(形状).建议你换个PCR试剂盒看看.
再问: 好的,我去看看~
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