设有一基因5'端和3'端部分序列如下:
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/11/19 15:56:43
设有一基因5'端和3'端部分序列如下:
ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点(AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点(CCCGGG),一边酶切后插入至某质粒的的对应位点中.(本题为2007年南京大学分子生物硕士考题)
ATTG ACG ATT GGT GTA TCG.CTA ATT GAG ACC TAA 请设计一对PCR引物,写出其序列,使其扩增产物的5'末端加上HidⅢ位点(AAGCTT),3'端加上SmaⅠ位点(CCCGGG),一边酶切后插入至某质粒的的对应位点中.(本题为2007年南京大学分子生物硕士考题)
在PCR引物中添加酶切位点的时候,必须加上保护碱基以保证后续的酶切顺利尽行,如无保护碱基,酶的活性往往会很低,因此最终的引物序列应该为:
FD:gcatg AAGCTT ATTG ACG ATT GGT GTA TCG
RD:atata CCCGGG TTA GGT CTC AAT TAG
其中,保护碱基因酶的不同可以适当增减个数,其次,它的碱基序列最好能和引物相补充,不会引起链内结构最好.
FD:gcatg AAGCTT ATTG ACG ATT GGT GTA TCG
RD:atata CCCGGG TTA GGT CTC AAT TAG
其中,保护碱基因酶的不同可以适当增减个数,其次,它的碱基序列最好能和引物相补充,不会引起链内结构最好.